侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)即深部真菌病,是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。临床上侵袭性真菌病存在“两低两高”的患病特点,即低诊断率、低治疗率、高感染率、高死亡率[1]。2020年全国真菌病监测网数据统计:真菌在各临床科室均可检出,其中检出最多的是呼吸科,其次是重症医学科、妇产科、普外科等。血清学检测方法利用免疫学上抗原抗体特异性结合原理,取材方便无创,操作简单,结果准确,能实现真菌的早期快速动态的检测。在2021年国家卫健委发布的《“提高住院患者抗菌药物治疗前病原学送检率”专项行动指导意见》明确要求G试验、GM试验检测可以作为常见病原学检测项目,应该提高抗菌药物治疗前送检率。2022年发布的《侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用专家共识》也对血清学检测方法进行了推荐,强调G试验、GM试验检测已经成为临床常规开展的真菌检测项目。根据相关指导意见及临床应用专家共识,成大附院医学检验科微生物室在开展G试验的基础上又新开展GM试验满足临床诊疗需求。
1. 啥是GM试验?
GM试验是检测患者标本中的曲霉菌半乳甘露聚糖抗原。半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成分,随着霉菌细胞壁表面菌丝生长,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原,可以作为曲霉菌感染临床诊断的微生物证据。
2. 怎么进行标本采集及送检呢?
2.1 标本采集
① 血液标本采集:一次性无菌无热原真空采血管(红头管),静脉血4mL,标本采集后应立即送检,患者早晨用药前空腹采血,血透患者透析前采血,溶血、高脂、黄疸等特殊样本不建议检测。
② 肺泡灌洗液采集:推荐灌洗量100mL(每次20mL,5次),回收率40%-60%,某些回收率低的灌洗部位(如:支气管肺段)应达30%以上。
2.2 标本送检
① 采集的血液样本在2-8℃冷藏保存运输;
② 肺泡灌洗液标本应立即转移到无菌密封容器中,避免污染并及时送检。
3. 检测结果该怎么看呢?
4. 具有什么样的临床意义呢?
① 是侵袭性曲霉菌感染诊断标准中重要的微生物学证据;
② 能够实现疾病感染的早期诊断,半乳甘露聚糖释放量与菌量成正比可以反映感染程度;
③ 缩短检测时间,可在临床症状出现前5-8d获得阳性结果,辅助医生尽快确诊;
④ 可实现对高危人群曲霉菌感染的动态监测,检测GM值作为治疗效果的参考指标之一。
5. 哪些因素会影响检测结果?
GM试验对其他真菌检测无效,且敏感性和特异性受诸多因素影响,以下情况可出现假阳性及假阴性:
6. GM试验与G试验联合检测的重要性?
GM试验适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断,可以判断出曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长。G试验能检测出包括曲霉菌和念珠菌在内的多种致病性真菌,但无法确定菌种。研究发现单独GM试验特异性90%,阳性预测值63.6%;单独G试验特异性72.5%,阳性预测值38.9%;GM试验和G试验二者联合试验特异性98.3%,阳性预测值提高至90%[2],简单来说,二者联合应用可以提高对侵袭性真菌病的诊断能力。
G试验与GM试验联合应用检测结果示意图
7. GM试验与G试验鉴定范围是什么呢?
综上,GM 试验具有特殊的检测意义,不能与G试验互相取代,建议临床同时开具检查,提高对侵袭性真菌病的诊断能力。值得注意的是由于GM试验存在假阳性及假阴性,所以加强临床沟通,有利于提高临床诊疗水平,保证医疗质量,让新项目的开展更好地服务于患者。
【参考文献】
[1] Min C , Cai L , Hui X , et al. Epidemiology of fungal infections in China[J]. Frontiers of Medicine, 2018, 12(001):58-75.
[2] Urabe N , Sakamoto S , Sano G , et al. Usefulness of two Aspergillus PCR assays and Aspergillus galactomannan and β-D-glucan testing of bronchoalveolar lavage fluid for diagnosis of chronic pulmonary aspergillosis[J]. Journal of Clinical Microbiology, 2017:JCM.02497-16.